Auto Induction Media自動(dòng)誘導培養基(AIM)所有組分已被配制混合好,用于IPTG誘導的表達菌株的生長(cháng),最初無(wú)需誘導,然后自動(dòng)誘導靶蛋白的產(chǎn)生,確保通常在高細胞密度下接近密度飽和。有限濃度的葡萄糖在生長(cháng)過(guò)程中優(yōu)先代謝,這阻止了乳糖的攝取,直到葡萄糖耗盡,通常在對數期的中后期。當葡萄糖耗盡時(shí),乳糖可以被β-半乳糖苷酶吸收并轉化為誘導劑allolactose。Allolactose導致lac阻遏因子從DNA中的特定結合位點(diǎn)釋放,從而誘導lacUV5啟動(dòng)子中T7 RNA聚合酶的表達并解斷T7lac啟動(dòng)子,允許T7 RNA聚合酶表達靶蛋白。
使用AIM培養基,高密度細胞生長(cháng)之后是蛋白質(zhì)表達的自發(fā)誘導。無(wú)需監測細胞密度(OD值),也無(wú)需使用IPTG進(jìn)行常規誘導。 AIM培養基的原理是基于培養基中的碳源,這些碳源經(jīng)過(guò)差異代謝,以促進(jìn)高密度細胞生長(cháng)并自動(dòng)誘導啟動(dòng)子的蛋白表達。
許多非誘導或自動(dòng)誘導培養物的平行生長(cháng)是可行的,因為培養物只需接種并生長(cháng)至飽和。 與傳統的IPTG誘導相比,這是一種極大的便利,簡(jiǎn)化了多個(gè)克隆的手動(dòng)或自動(dòng)誘導和分析,傳統的IPTG誘導需要監測每種培養物的生長(cháng)并在適當的生長(cháng)階段添加誘導劑。
GriSP的自誘導培養基Auto Induction Media,給蛋白誘導表達帶來(lái)極大的便利。實(shí)驗中常見(jiàn)的忘記檢測細胞OD值而錯過(guò)添加誘導劑IPTG的事情時(shí)長(cháng)發(fā)生。而自誘導培養基可以讓這些問(wèn)題終結。細菌培養,誘導表達想做就做,隨時(shí)做。葡萄牙GriSP品牌聯(lián)合靶點(diǎn)科技,提供大量現貨,給國內科研人員的蛋白誘導表達實(shí)驗添磚加瓦。
GriSP自誘導培養基Auto Induction Media系列包含:LB Broth(AIM), 2YT Broth(AIM), Terrific Broth(AIM) 和 Super Broth(AIM)共4種?,F貨聯(lián)系靶點(diǎn)科技。
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