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懸浮細胞和貼壁細胞基礎知識介紹

更新時(shí)間:2024-03-16   點(diǎn)擊次數:724次

體外培養細胞,根據它們是否能貼附在支持物上生長(cháng)的特性,可分為懸浮型貼壁型兩大類(lèi)。

(一)懸浮型細胞

簡(jiǎn)稱(chēng)懸浮細胞。在體外培養時(shí),這些細胞屬于非貼壁依賴(lài)的細胞,這些細胞的細胞質(zhì)膜也會(huì )與培養液底發(fā)生黏連,但最多不超過(guò)5%的表面與培養液底發(fā)生類(lèi)似于細胞連接樣的黏連,顯微視場(chǎng)下細胞往往呈球形。

懸浮型細胞主要是來(lái)源于血液、淋巴組織的細胞,骨髓瘤構建的各種雜交瘤細胞,某些腫瘤細胞和轉化細胞。

細胞呈圓形,一般不貼于支持物上,呈懸浮生長(cháng)。這類(lèi)細胞容易大量繁殖。

體外培養的細胞類(lèi)型中,少數細胞種類(lèi)在培養時(shí)不貼附于支持物上,而以懸浮狀態(tài)生長(cháng),包括一些取自血、脾或骨髓的原代細胞,尤其是血液白細胞,以及一些腫瘤細胞。某些來(lái)源于此類(lèi)細胞的細胞株或細胞系也呈懸浮狀態(tài)生長(cháng)。

細胞懸浮生長(cháng)時(shí)可以呈單個(gè)細胞或細小的細胞團,胞體為圓形。其優(yōu)點(diǎn)是在培養液中生長(cháng),生存空間大,允許長(cháng)時(shí)間生長(cháng),便于大量繁殖。

屬于懸浮型細胞常見(jiàn)的細胞株系有小鼠腹水瘤S180、小鼠骨髓瘤NS1和SP2/0,人造血系腫瘤細胞U937(見(jiàn)文章結尾圖片)、HL60、K562(見(jiàn)文章結尾圖片)等。技術(shù)詳情聯(lián)系靶點(diǎn)科技技術(shù)支持。

(二)貼壁型細胞

簡(jiǎn)稱(chēng)貼壁細胞。在體外培養時(shí),貼壁型細胞就是那些貼壁依賴(lài)的細胞,在匯合成單層生長(cháng)以前,它們的細胞質(zhì)膜超過(guò)30%的表面與培養液底發(fā)生類(lèi)似與細胞連接樣的黏連,顯微視場(chǎng)下細胞一般為扁平狀的各種形態(tài)。需要注意的是,貼壁型細胞匯合生長(cháng)形成單層以后,失去接觸抑制的那些細胞株或細胞系的細胞培養物中,常??梢?jiàn)或多或少的懸浮樣細胞出現。

貼壁型細胞包括大多數哺乳動(dòng)物的淋巴和血液以外的組織細胞,以及多數腫瘤細胞。需要貼附在帶適量正電荷的固體或半固體表面才能正常生長(cháng)和分裂。
大多數培養細胞均為貼壁型,它們必須貼附在支持物表面生長(cháng),這類(lèi)細胞在體內時(shí)各自具有其特殊的形態(tài),但在體外培養時(shí)貼附于支持物后形態(tài)上表現單一化而失去體內原有的某些特征,多呈上皮樣或成纖維細胞樣。

正常貼壁型細胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性,細胞相互接觸后可抑制細胞的運動(dòng),因此細胞不會(huì )相互重疊于其上面生長(cháng)。細胞生長(cháng)、匯合成片后,雖發(fā)生接觸抑制,但只要營(yíng)養充分,仍可增殖分裂,但當細胞數量達到一定密度后,由于營(yíng)養的枯竭和代謝物的影響,細胞分裂停止,稱(chēng)為密度抑制。

腫瘤細胞的接觸抑制及密度抑制往往減弱或消失,因此細胞可向三維空間發(fā)展,導致細胞堆積,并可生長(cháng)至較高的終末細胞密度。

貼壁細胞類(lèi)型有以下幾種常見(jiàn)類(lèi)型

1.成纖維細胞型

細胞呈梭形、扇形、星形或不規則三角形,中央有卵圓形核,胞質(zhì)常向外伸出3-5個(gè)長(cháng)短不一的突起,生長(cháng)時(shí)呈放射狀。細胞匯合過(guò)程中,細胞的生長(cháng)呈放射狀、火焰狀或漩渦狀。

除了真正的成纖維細胞外,凡由中胚層間充質(zhì)起源的組織,如心肌、平滑肌、成骨細胞、血管內皮等常呈成纖維細胞形態(tài)。培養中細胞的形態(tài)與成纖維細胞類(lèi)似時(shí)皆可稱(chēng)之為成纖維細胞(圖10-2)。

2.上皮型細胞

細胞呈扁平不規則多邊形,中央有圓形核,細胞外觀(guān)透明,細胞彼此緊密相連成單層生長(cháng)。生長(cháng)時(shí)呈膜狀移動(dòng),處于膜邊緣的細胞總與膜相連,很少單獨行動(dòng)。起源于內、外胚層的細胞如皮膚表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形態(tài)。上皮細胞傳代培養后形態(tài)特征逐漸趨于典型。

3.游走細胞型

呈散在生長(cháng),一般不連成片,胞質(zhì)常突起,呈活躍游走或變形運動(dòng),速度快且方向不規則。此型細胞不穩定,有時(shí)難以和其他細胞相區別。起源于網(wǎng)狀內皮系統的細胞屬于此類(lèi)型。

4.多型細胞型

有一些細胞,如神經(jīng)細胞難以確定其規律和穩定的形態(tài),統歸于此類(lèi)。此類(lèi)細胞在培養時(shí),其形態(tài)結構容易受培養條件(基質(zhì)、溫度、pH、營(yíng)養、污染狀況和培養方式等)影響。

如角膜上皮細胞在膠原基質(zhì)上的形態(tài)與體內天然形態(tài)相似,但在塑料基質(zhì)表面細胞呈單層生長(cháng),細胞呈扁平形。上皮型Hela細胞在偏酸或偏堿的培養環(huán)境下會(huì )停止生長(cháng),細胞形態(tài)呈梭形、不規則形,及時(shí)糾正pH后,細胞又恢復原來(lái)的正常形態(tài)。

盡管懸浮細胞無(wú)須消化,但是對于有些實(shí)驗,需要像貼壁細胞一樣固定懸浮細胞,困擾了很多實(shí)驗人員,于是有了細胞掉片一說(shuō)。靶點(diǎn)科技懸浮細胞固定專(zhuān)用玻片Shi-Fix,給這個(gè)困擾提供了解決方案。無(wú)論您是要固定懸浮細胞做免疫熒光,還是固定懸浮便于刺激,亦或固定懸浮細胞用于接觸反應。靶點(diǎn)科技都能給您提供方案,期待您的咨詢(xún)。



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